氨氮是水體中氮元素的一種存在形式，主要來源于生活污水、工業(yè)廢水及農(nóng)業(yè)徑流。其含量高低直接反映水體受污染程度，也是水質(zhì)評價的關(guān)鍵指標(biāo)之一。分光光度法因操作簡便、靈敏度高、設(shè)備普及，成為實驗室測定氨氮的常用手段。本文以納氏試劑分光光度法為例，闡述檢測流程及注意事項。

一、方法原理

水樣中的氨氮與納氏試劑（碘化汞鉀的堿性溶液）在堿性條件下發(fā)生反應(yīng)，生成黃棕色絡(luò)合物。該絡(luò)合物的色度與氨氮濃度呈正比，在波長420 nm處測定吸光度，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線定量。反應(yīng)式可簡寫為：氨與碘化汞鉀生成氨基碘化汞棕黃色沉淀或膠體復(fù)合物。

二、試劑與儀器準(zhǔn)備

核心試劑包括：無氨水（用于稀釋和清洗，避免背景干擾）、納氏試劑（市售成品或按標(biāo)準(zhǔn)配制）、酒石酸鉀鈉溶液（掩蔽鈣鎂等金屬離子，消除沉淀干擾）、氨氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液（通常為氯化銨配制）。儀器主要包括可見分光光度計（配1 cm或2 cm比色皿）、比色管（50 mL）、移液管或移液器及預(yù)處理用濾紙或離心機。

三、樣品采集與保存

水樣應(yīng)采集于潔凈玻璃或聚乙烯瓶中，充滿瓶塞以減少空氣接觸。采樣后立即測定最佳；若不能及時分析，需加硫酸至pH＜2，于4℃冷藏，并在24小時內(nèi)完成檢測。測定前恢復(fù)室溫并用氫氧化鈉或鹽酸調(diào)回中性。

四、測定步驟

第一，樣品預(yù)處理。對于澄清透明、不含懸浮物的水樣可直接測定。若水樣渾濁或帶色，需經(jīng)絮凝沉淀或蒸餾預(yù)處理。絮凝法：加入硫酸鋅和氫氧化鈉，沉淀后取上清液。蒸餾法適用于干擾嚴(yán)重的水樣。

第二，標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制。取6支50 mL比色管，分別加入0、0.5、1.0、2.0、3.0、5.0 mL氨氮標(biāo)準(zhǔn)使用液（濃度自定，如10 mg/L），加無氨水至標(biāo)線。依次加入1.0 mL酒石酸鉀鈉溶液，混勻；再加1.5 mL納氏試劑，再次混勻。靜置10分鐘顯色。

第三，樣品測定。取適量預(yù)處理后的水樣（含氨氮不超過0.1 mg）于比色管中，加無氨水至50 mL標(biāo)線。按與標(biāo)準(zhǔn)曲線相同的順序加入酒石酸鉀鈉和納氏試劑，同條件下顯色。

第四，吸光度測量。以無氨水為參比，于420 nm波長處測定各標(biāo)準(zhǔn)管及樣品管的吸光度。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（吸光度－氨氮質(zhì)量），從曲線上查得樣品管對應(yīng)的氨氮質(zhì)量，再除以取樣體積即得濃度。

五、關(guān)鍵注意事項

納氏試劑含汞鹽，屬劇毒物質(zhì)，操作須佩戴手套護目鏡，廢液集中回收。顯色時間和溫度應(yīng)盡量一致，避免因反應(yīng)程度不同引入誤差。酒石酸鉀鈉溶液需檢驗是否含氨，否則會導(dǎo)致空白升高。比色皿光面須保持清潔，測定后立即清洗。若樣品吸光度超出標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍，應(yīng)稀釋后重新測定。

納氏試劑分光光度法的檢出限通常為0.025 mg/L，測定下限約0.1 mg/L，適用于地表水、地下水及生活污水中的氨氮分析。對于工業(yè)廢水中較高濃度氨氮，可適當(dāng)減少取樣量或稀釋后再測。該方法重現(xiàn)性好，但須嚴(yán)格排除干擾，特別是色度、濁度和金屬離子的影響。